Ein Antibiogramm wird erstellt, wenn die Empfindlichkeitsprüfung des nachgewiesenen Keimes sinnvoll erscheint. Die Art der Empfindlichkeitsprüfung richtet sich u. a. nach dem Empfindlichkeitsspektrum bestimmter Bakterien, dem eingesandten Material und der Fragestellung.
Die Testung erfolgt generell nach dem CLSI-Regelwerk (Clinical & Laboratory Standards Institute). Wenige Ausnahmen werden nach dem Regelwerk der EUCAST (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) getestet: Helicobacter pylori, Campylobacter jejuni/ coli und Corynebacterien.